听力损失是常见的感官障碍之一，尤其在新生儿中。遗传因素导致的听力损失占比高达60%。目前尚无有效的方法可以恢复遗传性听力损失患者的自然听觉感知。近年来AAV基因疗法在治疗遗传性耳聋方面展现了巨大的潜力。然而，先前的AAV基因治疗研究大多集中于特定内耳细胞类型（尤其是毛细胞）中的基因，如Otof、Tmc1、Strc和Kcne1基因等，而对广泛表达于多种内耳细胞的耳聋基因关注较少。
髓鞘蛋白P0样蛋白2（Myelin protein zero-like 2）是由MPZL2基因编码的一种细胞黏附分子，广泛表达于耳蜗细胞中，包括Deiters细胞（DC）、内毛细胞（IHC）、外毛细胞（OHC）和血管纹（SV）等。MPZL2基因突变可导致常染色体隐性非综合征型耳聋（DFNB111），是轻至中度遗传性耳聋的第二大致病因素，因此对MPZL2相关的听力损失进行基因治疗具有重要意义。
近日，复旦大学附属眼耳鼻喉科医院舒易来、何英姿团队在 The American Journal of Human Genetics 杂志（IF=8.7）上发表了题为“Hearing restoration by gene replacement therapy for a multisite-expressed gene in a mouse model of human DFNB111 deafness”的研究论文，探索了AAV基因治疗Mpzl2相关听力损失的可能性。
研究团队首先通过CRISPR-Cas9技术生成Mpzl2基因敲除小鼠，这些小鼠表现出缓慢进展的听力损失，模拟了DFNB111型听力损失的表型。接着使用AAV-ie载体系统递送MPZL2基因，注射到小鼠耳蜗，测量注射前后小鼠的听觉脑干反应（ABR）和畸变产物耳声发射（DPOAE）阈值变化，并通过免疫荧光染色观察耳蜗细胞的结构变化，评估OHCs和DCs的存活率与结构完整性（图1）。
图1 文章摘要
听觉功能的显著恢复
AAV-ie-Mpzl2给药后，Mpzl2基因敲除小鼠的听觉功能得到显著改善。ABR和DPOAE测试显示，这些小鼠的听觉阈值在注射后至少7个月内持续降低，特别是在高频率范围内（16 kHz及以上）的改善最为明显。
耳蜗细胞结构完整性恢复，存活率提高
AAV-ie系统能够高效地转导不同类型的耳蜗细胞。注射AAV-ie-Mpzl2后，小鼠耳蜗中的OHCs和DCs的存活率显著提高，并恢复了细胞的结构完整性。
长期效果和安全性
AAV-ie-Mpzl2治疗的效果可维持至少7个月，并且未发现任何显著的副作用或组织损伤。这表明AAV-ie-Mpzl2具有良好的有效性和安全性。
总之，这项研究首次证明了AAV-ie-Mpzl2能有效恢复DFNB111型耳聋小鼠模型的听觉功能。研究结果为未来的遗传性耳聋基因治疗，尤其是针对多细胞类型的基因突变提供了重要的实验基础。派真生物有幸为本研究提供了AAV病毒包装服务，助力遗传性耳聋基因治疗研究。
本篇文章AAV的导入方式：
| 实验动物 | P0-P2 Mpzl2-/-和 Mpzl2+/+小鼠 |
| 血清型 | AAV-ie |
| 启动子 | CMV |
| 注射方式 | 通过圆窗膜进行内耳注射 |
| 注射剂量 | 病毒滴度1 x 10^13 vg/mL，注射体积1~2 μL |
| 检测时间 | 感染后1周 |
参考文献：
Jiang et al., Hearing restoration by gene replacement therapy for a multisite-expressed gene in a mouse model of human DFNB111 deafness, The American Journal of Human Genetics (2024), http://doi.org/10.1016/j.ajhg.2024.08.008.
2025-06-15
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