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siRNA转染篇丨qPCR没变化？&蛋白表达量不见下降？

siRNA转染 蛋白
05/13
25


siRNA转染



上一个系列小恒给大家详细介绍了细胞转染相关的问题，接下来，将为大家详细讲述siRNA转染的实验操作细节及注意事项和实验难点。



1


qPCR没变化？


转染了siRNA后，使用qPCR检测mRNA却没有发现显著性变化时，可以从一下几方面寻找问题：

  1. 实验操作、2.检测时间、3.细胞状态、4.干扰序列。

具体详细排查操作，请观看下方视频~



2


蛋白表达量不见下降？


siRNA或shRNA直接作用于mRNA，因此mRNA水平的检测是最直接的指标。一般而言蛋白表达量会随着mRNA变化而改变。

但也存在部分蛋白下降水平和mRNA下降水平不对应的现象。

可以排查一下原因：①检测时间过早，②细胞存在翻译调节。

详细细节，详见下方视频~




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